贴壁细胞毒性检测用mtt mts，cck8哪种效果好
齐氏生物细胞生物学产品专家认为CCK8更好些，优点如下：
细胞活性检测是cck8检测吗 细胞活性检测方法cck
细胞活性检测是cck8检测吗 细胞活性检测方法cck
1）使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和；
2）CCK-8法能快速检测；
3）CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；
4）CCK-8法的重复性优于MTT 法；
5）CCK-8法对细胞毒性小；
6）CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。
当然，与MTT相比，CCK8有以下2点不足：
1）与MTT法相 比，CCK8和XTT的价格比较贵。
2）CCK8试剂的颜色为淡红色，与含酚红的培养基颜色接近，不注意的话容易产生漏加或多加。
为更好了解CCK8、MTT、 XTT等检测方法，齐氏生物细胞生物学产品专家制定下表，以供参考：
cck8测细胞增值率数据怎么统计
已取得5天的结果：如果是连续每天一组数据,那么各组现已有天至第五天五组数据,组内比较采用重复测量方分析，两组间比较（每天）用样本T检验。
如果不是连续每天一组数据：组内比较采用配对T检验，两组间比较用样本T检验。
CCK-8试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。用于物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤敏试验。
扩展资料：
CCK8的优点：
1、使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和；
2、CCK-8法能快速检测；
3、CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；
4、CCK-8法的重复性优于MTT 法；
5、CCK-8法对细胞毒性小；
6、CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用
参考资料：
细胞活性检测的方法有多少种
细胞活性测定方法有台盼蓝染色法、克隆（集落）形成法、 3H 放射性同位素掺入法、 MTT 法等。其中 MTT 法以其快速简便，不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测的特点而得到广泛的应用。但 MTT 法形成的 Formazan 为水不溶性的，需要加溶解，由于在去上清作时会有可能带走小部分的 Formazan ，故有时重复性略。为了解决这个问题，研究人员又开发了很多种水溶性的四氮唑盐类：如 XTT 、 CCK-8 （ WST-8 ）等。
细胞活性检测的方法有多少种 ？每种的原理是什么？
在目前的细胞活性检测方法中，MTT法是较早且较为经典的方法。但是，由于MTT法形成的甲物是非水溶性的，需要加溶解，这不仅增加了研究人员的工作量，也给实验带来了一定的误。在这里我们向大家介绍一种国外检测方法—CCK-8法，它具有方便、灵敏、快速、无放射性、重复性好的特点。现在已广泛用于细胞增殖检测、细胞毒性检测、物筛选、敏试验等。
另外还将向大家介绍几种氧化应激和蛋白质抗体标记的新方法。
内容：
1、新型细胞活性检测方法介绍
2、国外氧化应激测定方法介绍
3、蛋白质抗体标记的新方法介绍
原理恕在下不知
细胞活性和细胞毒性检测的实验方法？
细胞数量确定
1.将细胞悬浮液（100μL/孔）接种在96洞孔板中。将板在潮湿的培养箱中预孵育（例如，在37℃，5％CO2下）。
2.向板的每个孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入气泡，因为它们会干扰O.D.读数。
3.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。
4.使用酶标仪测量450 nm处的吸光度。
细胞增殖和细胞毒性测定
1.将种子细胞以103-104个细胞/孔的密度在96孔板中在100μL培养基中培养。将细胞在CO2培养箱中于37℃培养24小时。
2.将不同浓度的待测物质加入板中。
3.将培养板在培养箱中孵育适当的时间（例如，6,12,24或48小时）。
4.使用重复移液器向板的每个孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入气泡，因为它们会干扰O.D.读数。
5.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。
6.在读取孔板之前，重要的是在轨道振动器上轻轻混合1分钟，以确保颜色均匀分布。
7.使用酶标仪测量450 nm处的吸光度。
数据分析
统计分析有几种方法，您可以选择使用O.D.值或细胞数量，我们提供其中一种方法。
细胞（％）= [（As-Ab）/（Ac-Ab）]×100
抑制率（％）= [（Ac-As）/（Ac-Ab）]×100
As =实验孔吸光度（含有细胞，培养基，CCK-8和待测化合物的孔的吸光度）。
Ab =空白孔吸光度（含有培养基和CCK-8的孔的吸光度）。
Ac =对照孔吸光度（含有细胞，培养基和CCK-8的孔的吸光度）。
制作标准曲线
1. 细胞计数板计数细胞悬液中的细胞数。
2. 使用培养基，等比稀释细胞悬液为一个浓度梯度，通常需要5-7个浓度梯度，每组几个复孔。然后接种细胞。（注意每孔的细胞数量。如果您将细胞悬液稀释在管中，在加入培养板的孔之前，请小心再次混匀细胞。每孔中细胞悬液的体积应该是一致的。）
3. 培养直至细胞贴壁（通常2-4小时），然后每100 μl培养基加入10 μl CCK-8。继续孵育1-4小时，用酶标仪测量450nm处的吸光度。制作出一条以细胞数为X轴坐标，O.D.值为Y轴坐标的标准曲线。
可以基于该曲线确定待测样品的细胞数。使用此标准曲线的先决条件是培养检测条件相同。
注意事项
1. 确保物和CCK8均匀分布在培养基中。
2. 细胞增殖越多, 颜色越深; 细胞毒性越强，颜色越浅。
3. 对于贴壁细胞，每孔至少需要1000个细胞（100 μl培养基）。对于白细胞，由于灵敏度较低，每孔至少需要0个细胞（100 μl培养基）。的96孔板每孔细胞数为00。如果使用24孔或6孔板进行该检测，请计算相应的每孔的细胞数，并调整CCK-8的体积，使其为每孔总液体体积的10％。
4. 因为CCK8测定是基于活细胞中的脱氢酶活性，影响脱氢酶活性的条件或化学物质可能导致实际活细胞数与使用CCK-8测定活细胞数之间有异。
5. WST-8可能与还原剂反应生成WST-8 formazan。如果使用还原剂 (例如一些抗氧化剂)会干扰检测。如果待检测体系中存在较多的还原剂，需设法去除。
6. 孵育2小时后，背景O.D.值一般为0.1-0.2单位。
7. 注意不要在孔中引入气泡，因为它们会干扰O.D.值。
8. 如果您想对CCK8溶液进行灭菌，请使用0.2 μm的膜过滤溶液。
9. 孵育时间因孔中细胞的类型和数量而异。通常，白细胞着色较弱，因此可能需要较长的孵育时间（长达4小时）或大量细胞（~105细胞/孔）。
10. 如果细胞悬液中存在高浊度, 测量并减去样品在600nm或更高波长的O.D值。
11. CCK8不能用于细胞染色。
12. 培养基中的酚红不会影响实验结果，酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。
13. CCK8的毒性非常低，在CCK8测定完成后，相同的细胞可用于其他细胞增殖测定，例如结晶紫测定，中性红测定或DNA荧光测定。（除非细胞极为稀少，不。）
14. 该试剂盒可用于大肠杆菌，但不能用于酵母细胞。
15. 在读取平板之前，您可以在摇床上轻柔混匀。
16. 我们建议将细胞接种在靠近培养板的孔中，最外围一圈孔中的培养基容易蒸发，可以用PBS，水或培养基填充这些孔。
17. 如果您没有450nm滤光片。您也可以使用吸光度在430和490nm之间的滤光片, 450nm滤光片具有灵敏度。
18. 测量450nm处的吸光度，如果您需要进行双波长测定，作为参考波长可以测定650nm处的吸光度。
19. 物中金属离子的存在可能会影响CCK8的灵敏度。终浓度为1mM的氯化亚铅、、硫酸铜会抑制 5%、15%、 90% 的显色反应，使灵敏度降低。如果终浓度是10mM的话，将会抑制。
Glpbio是新启的的高性能的生命科学产品供应商之一，产品涵盖癌症、神经科学、抗感染、表观遗传学等20个热门研究领域，覆盖Akt、Jak等近千个细分靶点。
上海宏叶生物科技有限公司是GlpBio在区的总。
测试剂 Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
